蛋白溶液的濃縮

    蛋白溶液的濃縮技術，目前常用的有化學吸水劑濃縮，透析袋表面蒸發濃縮、超過濾濃縮及冷凍干燥等方法。

    1、化學吸水劑濃縮：

    將濃縮前的蛋白液裝入透析袋中，把透析袋外邊覆蓋上干的吸水劑，像聚乙二醇（PEG）或者聚乙烯吡咯烷酮（Polyvlny1Prrolidine Pvp）等，也可以將裝有樣品的透析袋浸于20%~30%PEG溶液中，濃縮至所需體積，即可將樣品取出。

    當要濃縮小體積的樣品時，也可以用交聯度高的凝膠顆粒（如SePhadex G-25）或干燥的聚丙烯酰胺凝膠條（T）10%以上）直接放到待濃縮的樣品液中，當凝膠膨脹后即吸收部分水分以達到濃縮目的。

    2、蒸發法：

    將待濃縮的溶液置于透析袋中，然后將透析袋掛在冰箱中，或用電扇吹風。水分通過半透膜擴散并蒸發。此法隨簡便易行，但效率低。且濃縮后樣品鹽分高，適宜小體積，時間不緊迫的情況下采用此方法。

    3、超過率法：

    超過濾法濃縮各種大分子溶液，具有速度快、不影響生物活性、不消耗任何試劑，同事還可以用脫鹽及去除小分子雜質相結合等優點，它是當前免疫化學與生物化學中濃縮**方法，操作步驟同脫鹽的幾點。

    4、冷凍干燥法：

    生物樣品的冷凍干燥方法，即是制備**或長期保存樣品的手段，也是高分子溶液的濃縮的較好方法，在具備冷凍設備的條件下都可以進行。

    主要技術要點：

    （1）樣品的處理，如果干燥前樣品濃度低于1mg/ml，或者凍干過程會被破壞其生物活性，需要預先加入一定濃度的蛋白保護劑。

    （2）預冷樣品，常用乙醇干冰或低溫冰箱預凍，將蛋白液薄薄的預凍在干燥的容器壁上。

    （3）低溫干燥因干燥機種類較多，操作不一，不再贅述。