技術文獻

實驗室常用貯存液的配制(3)

22 10mmol/L 苯甲基磺酰氟( PMSF )溶液

【配制方法】用異丙醇溶解 PMSF 1.74mg/ml 10mmol/L ),分裝成小份貯存于 -20 ℃ 。如有必要可配成濃度

高達 17.4mg/ml 的貯存液( 100mmol/L )。

【注意】 PMSF 嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或 皮

膚接觸了 PMSF ,應立即用大量水沖洗之。凡被 PMSF 污染的衣物應予丟棄。 PMSF 在水溶液中不穩定。應在使用

前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中。 PMSF 在水溶液中的活性喪失速率隨 pH 值的升高而加快,且 25 ℃ 的失活

速率高于 4 ℃ 。 pH 值為 8.0 時, 20 μ mmol/l PMSF 水溶液的半壽期大約為 85min ,這表明將 PMSF 溶液調節 為堿

性( pH>8.6 )并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄。

23 .磷酸鹽緩沖溶液( PBS )溶液

【配制方法】在 800ml 蒸餾水中溶解 8g NaCl 、 0.2g KCl 、 1.44g Na2HPO4 0.24g KH2PO4, HCl 調節 溶 液

pH 值至 7.4 加水定容至 1L ,在 15lbf/in2(1034 × 105Pa) 高壓下蒸氣滅菌 20min 。保存于室溫。

24 1mol/L 乙酸鉀( pH7.5 )溶液

【配制方法】將 9.82g 乙酸鉀溶解于 90ml 純水中,用 2mol/L 乙酸調節 pH 值至 7.5 后加入純水定容到 1L ,

保存于 -20 ℃ 。

25 .乙酸鉀溶液(用于堿裂解)

【配制方法】在 60ml 5mol/L 乙酸鉀溶液中加入 11.5ml 冰乙酸和 28.5ml 水,即成鉀濃度為 3mol/L 而乙酸根濃

度為 5mol/L 的溶液。

26 3mol/L 乙酸鈉( pH5.2 pH7.0 )溶液

【配制方法】在 80ml 水中溶解 408.1g 三水乙酸鈉,用冰乙酸調節 pH 值至 5.2 或用稀乙酸調節 pH 值至 7. 0 ,

加水定容到 1L ,分裝后高壓滅菌。

27 5mol/L NaCl 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 292.2g NaCl 加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。

28 10% 十二烷基硫酸鈉( SDS )溶液

【配制方法】在 900ml 水中溶解 100g 電泳級 SDS ,加熱至 68 ℃ 助溶,加入幾滴濃鹽酸調節 溶液的 pH 值至

7.2 ,加水定容至 1L ,分裝備用。

【注意】 SDS 的微細晶粒易擴散,因此稱量時要戴面罩,稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區和天平上的 SD S ,

10%SDS 溶液無須滅菌。

29 20 × SSC 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 175.3g NaCl 88.2g 檸檬酸鈉,加入數滴 10mol/l NaOH 溶液調節 pH 值至

7.0 ,加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。

30 20 × SSPE 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 17.5g NaCl 、 27.6g NaH2PO4?H2O 7.4g EDTA ,用 NaOH 溶液調節 pH

7.4 (約需 6.5ml 10ml/L NaOH ),加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。

31 100% 三氯乙酸溶液

【配制方法】在裝有 500g TCA 的瓶中加入 227ml 水,形成的溶液含有 100% M/V TCA 。

32 1mol/L Tris 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 121.91g Tris 堿,加入濃 HCl 調節 pH 值至所需值。應使溶液冷至室溫后方 可

最后調定 pH 值,加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。

【注意】如 1mol/L 溶液呈現黃色,應予丟棄并置備質量更好的 Tris 。

盡管多種類型的電極均不能準確測量 Tris 溶液的 pH 值,但仍可向大多數廠商購得合適的電極。 Tris 溶液的 p H

值因溫度而異,溫度每升高 1 ℃ , pH 值大約降低 0.03 個單位。例如: 0.05mol/L 的溶液在 5 ℃ 、 25 ℃ 、和 37 ℃ 時 的

pH 值分別為 9.5 、 8.9 8.6 。

33 Tris 緩沖鹽溶液( TBS )( 25mmol/l Tris

【配制方法】在 800ml 蒸餾水中溶解 8g NaCl 、 0.2g KCl 3g Tris 堿,加入 0.015g 酚并用 HCl 調至 pH 值至 7 .4 ,

用蒸餾水定容至 1L ,分裝后在 151bf/in2(1.034 × 105Pa) 高壓下蒸汽滅菌 20min ,于室溫保存。

34 X-gal 溶液

【配制方法】 X-gal 5- -4- -3- 吲哚 - β -D 半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解 X-gal 配制成的 20mg/ml 的貯存液。

保存于一玻璃管或聚丙烯管中,裝有 X-gal 溶液的試管須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞,并應貯存于 -20 ℃ 。

X-gal 溶液無須過濾除菌。