實驗室常用貯存液的配制(3)22 . 10mmol/L 苯甲基磺酰氟( PMSF )溶液 【配制方法】用異丙醇溶解 PMSF 成 1.74mg/ml ( 10mmol/L ),分裝成小份貯存于 -20 ℃ 。如有必要可配成濃度 高達 17.4mg/ml 的貯存液( 100mmol/L )。 【注意】 PMSF 嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一旦眼睛或 皮 膚接觸了 PMSF ,應立即用大量水沖洗之。凡被 PMSF 污染的衣物應予丟棄。 PMSF 在水溶液中不穩定。應在使用 前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中。 PMSF 在水溶液中的活性喪失速率隨 pH 值的升高而加快,且 25 ℃ 的失活 速率高于 4 ℃ 。 pH 值為 8.0 時, 20 μ mmol/l PMSF 水溶液的半壽期大約為 85min ,這表明將 PMSF 溶液調節 為堿 性( pH>8.6 )并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄。
23 .磷酸鹽緩沖溶液( PBS )溶液 【配制方法】在 800ml 蒸餾水中溶解 8g NaCl 、 0.2g KCl 、 1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4, 用 HCl 調節 溶 液 的 pH 值至 7.4 加水定容至 1L ,在 15lbf/in2(1034 × 105Pa) 高壓下蒸氣滅菌 20min 。保存于室溫。
24 . 1mol/L 乙酸鉀( pH7.5 )溶液 【配制方法】將 9.82g 乙酸鉀溶解于 90ml 純水中,用 2mol/L 乙酸調節 pH 值至 7.5 后加入純水定容到 1L , 保存于 -20 ℃ 。
25 .乙酸鉀溶液(用于堿裂解) 【配制方法】在 60ml 5mol/L 乙酸鉀溶液中加入 11.5ml 冰乙酸和 28.5ml 水,即成鉀濃度為 3mol/L 而乙酸根濃 度為 5mol/L 的溶液。
26 . 3mol/L 乙酸鈉( pH5.2 和 pH7.0 )溶液 【配制方法】在 80ml 水中溶解 408.1g 三水乙酸鈉,用冰乙酸調節 pH 值至 5.2 或用稀乙酸調節 pH 值至 7. 0 , 加水定容到 1L ,分裝后高壓滅菌。
27 . 5mol/L NaCl 溶液 【配制方法】在 800ml 水中溶解 292.2g NaCl 加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。
28 . 10% 十二烷基硫酸鈉( SDS )溶液 【配制方法】在 900ml 水中溶解 100g 電泳級 SDS ,加熱至 68 ℃ 助溶,加入幾滴濃鹽酸調節 溶液的 pH 值至 7.2 ,加水定容至 1L ,分裝備用。 【注意】 SDS 的微細晶粒易擴散,因此稱量時要戴面罩,稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區和天平上的 SD S , 10%SDS 溶液無須滅菌。
29 . 20 × SSC 溶液 【配制方法】在 800ml 水中溶解 175.3g NaCl 和 88.2g 檸檬酸鈉,加入數滴 10mol/l NaOH 溶液調節 pH 值至 7.0 ,加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。
30 . 20 × SSPE 溶液 【配制方法】在 800ml 水中溶解 17.5g NaCl 、 27.6g NaH2PO4?H2O 和 7.4g EDTA ,用 NaOH 溶液調節 pH 值 至 7.4 (約需 6.5ml 10ml/L NaOH ),加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。
31 . 100% 三氯乙酸溶液 【配制方法】在裝有 500g TCA 的瓶中加入 227ml 水,形成的溶液含有 100% ( M/V ) TCA 。
32 . 1mol/L Tris 溶液 【配制方法】在 800ml 水中溶解 121.91g Tris 堿,加入濃 HCl 調節 pH 值至所需值。應使溶液冷至室溫后方 可 最后調定 pH 值,加水定容至 1L ,分裝后高壓滅菌。 【注意】如 1mol/L 溶液呈現黃色,應予丟棄并置備質量更好的 Tris 。 盡管多種類型的電極均不能準確測量 Tris 溶液的 pH 值,但仍可向大多數廠商購得合適的電極。 Tris 溶液的 p H 值因溫度而異,溫度每升高 1 ℃ , pH 值大約降低 0.03 個單位。例如: 0.05mol/L 的溶液在 5 ℃ 、 25 ℃ 、和 37 ℃ 時 的 pH 值分別為 9.5 、 8.9 和 8.6 。
33 . Tris 緩沖鹽溶液( TBS )( 25mmol/l Tris ) 【配制方法】在 800ml 蒸餾水中溶解 8g NaCl 、 0.2g KCl 和 3g Tris 堿,加入 0.015g 酚并用 HCl 調至 pH 值至 7 .4 , 用蒸餾水定容至 1L ,分裝后在 151bf/in2(1.034 × 105Pa) 高壓下蒸汽滅菌 20min ,于室溫保存。
34 . X-gal 溶液 【配制方法】 X-gal 為 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 - β -D 半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解 X-gal 配制成的 20mg/ml 的貯存液。 保存于一玻璃管或聚丙烯管中,裝有 X-gal 溶液的試管須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞,并應貯存于 -20 ℃ 。 X-gal 溶液無須過濾除菌。 上一篇蛋白溶液的濃縮
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