技術文獻

實驗室常用貯存液的配制(2)

10 2.5mol/L CaCl2 溶液

【配制方法】在 20ml 蒸餾水中溶解 13.5g CaCl2?6H2O ,用 0.22 μ m 濾器過濾除菌,分裝成 1ml 小份貯存于 -20 ℃ 。

11 1mol/L 二硫蘇糖醇( DTT )溶液

【配制方法】用 20ml 0.01mol/L 乙酸鈉溶液( pH5.2 )溶解 3.09g DTT ,過濾除菌后分裝成 1ml 小份貯存于 -20 ℃ 。

【注意】 DTT 或含有 DTT 的溶液不能進行高壓處理。

12 .脫氧核苷三磷酸( dNTP )溶液

【配制方法】把每一種 dNTP 溶解于水至濃度各為 100mmol/L 左右,用微量移液器吸取 0.05mol/l Tris 堿分別 調

每一 dNTP 溶液的 pH 7.0 (用 pH 試紙檢測),把中和后的每種 dNTP 溶液各取一份作適當稀釋,在給出的 波

長下讀取光密度計算出每種 dNTP 的實際濃度,然后用水稀釋成終濃度為 50mmol/L dNTP ,分裝成小份貯存于 -

70 ℃ 。

13 0.5mol/l EDTA(pH8.0) 溶液

【配制方法】在 800ml 水中加入 186.1g 二水乙二胺四乙酸二鈉( EDTA-Na?2H2O ),在磁力攪拌器上劇烈攪拌 ,

NaOH 調節 溶液的 pH 值至 8.0 (約需 20g NaOH 顆粒)然后定容至 1L ,分裝后高壓滅菌備用。

【注意】 EDTA 二鈉鹽需加入 NaOH 將溶液的 pH 值調至接近 8.0 ,才能完全溶解。

14 .溴化乙錠( 10mg/ml 溶液)

【配制方法】在 100ml 水中加入 1g 溴化乙錠,磁力攪拌數小時以確保其完全溶解,然后用鋁箔包裹容器或轉

移至棕色瓶中,保存于室溫。

【注意】小心:溴化乙錠是強誘變劑并有中度毒性,使用含有這種染料的溶液時務必戴上手套,稱量染料時

戴面罩。

15 2 × HEPES 緩沖鹽溶液

【配制方法】用總量為 90ml 的蒸餾水溶解 1.6g NaCl 、 0.074g KCl 、 0.027g Na2PO4?2H2O 、 0.2g 葡聚糖和 1g HEPES ,

0.5mol/l NaOH 調節 pH 值至 7.05 ,再用蒸餾水定容至 100ml 。用 0.22 μ m 濾器過濾除菌,分裝成 5ml 小份,貯

存于 -20 ℃ 。

16 IPTG 溶液

【配制方法】 IPTG 為異丙基硫代 - β -D- 半乳糖苷(分子量為 238.3 ),在 8ml 蒸餾水中溶解 2g IPTG 后,用蒸餾

水定容至 10ml ,用 0.22 μ m 濾器過濾除菌,分裝成 1ml 小份貯存于 -20 ℃ 。

17 1mol/L 乙酸鎂溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 214.46g 四水乙酸鎂,用水定容至 1L 過濾除菌。

18 1mol/L MgCl2 溶液

【配制方法】在 800ml 水中溶解 203.4g MgCl2?6H2O ,用水定容至 1L ,分裝成小份并高壓滅菌備用。

【注意】 MgCl2 極易潮解,應選購小瓶(如 100g )試劑,啟用新瓶后勿長期存放。

19 β - 巰基乙醇( BME )溶液

【配制方法】一般得到的是 14.4mol/L 溶液,應裝在棕色瓶中保存于 4 ℃ 。

【注意】 BME 或含有 BME 的溶液不能高壓處理。

20 NBT 溶液

【配制方法】把 0.5g 氯化氮藍四唑溶解于 10ml 70% 的二甲基甲酰胺中,保存于 4 ℃ 。

21 .酚 / 氯仿溶液

【配制方法】把酚和氯仿等體積混合后用 0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6) 抽提幾次以平衡這一混合物,置棕色玻璃 瓶

中,上面覆蓋等體積的 0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6) 液層,保存于 4 ℃ 。

【注意】酚腐蝕性很強,并可引起嚴重灼傷,操作時應戴手套及防護鏡,穿防護服。所有操作均應在化學通

櫥中進行。與酚接觸過的部位皮膚應用大量的水清洗,并用肥皂和水洗滌,忌用乙醇。